在几公里的范围内，不同原野上成熟的雄性经常在相对固定的地点上飞来飞去，形成所谓的雄性聚集区。
发育成熟、羽化出房的蜂王称为处女王。3~5日龄的处女王出巢试飞,以熟悉蜂巢的位置,在5-15日龄进行婚飞。1只处女王常在7~17只雄蜂交配,1次婚飞就能先后与数只雄蜂交配。如果在1次婚飞中受精不足,在同一天或者以后几天内可能再进行婚飞。
处女王出巢飞到雄蜂聚集区,在那里飞翔着的雄蜂受飞来蜂王信息素的吸引,成群地追逐蜂王。追上蜂王的1只雄蜂,用1对前足和1对中足抓住蜂王的背部,用1对后足抱住其腹部,立刻弯起腹部,借肌肉的收缩和空气的压力将内阳茎从体内翻出,插入蜂王的阴道内,将精液射入阴道和1对侧输卵管。
随后雄蜂向后摆动,内阳茎从颈部的外口处撕断,与蜂王分离。雄蜂不久后死亡。
蜂王带着留在整针腔内的交配标志飞走。交配标志是由雄蜂黏液腺射出的黏液和内阳茎上脱落的几丁质片构成的,它将鳖针腔堵塞,不使精液外溢。蜂王在进行重复交配时,雄蜂内阳茎上的菱形毛片能将交配标志粘住、拉出。所以,蜂王螫针腔有交配标志对再次交配不会造成障碍。
交配完毕,蜂王带着最后一只与其交配雄蜂留下的交配标志返回蜂巢,以后由工蜂帮助将交配标志除去。大约经过1天多的时间,精子转移到受精囊中。受精囊能贮存500万~60万个精子,可供蜂王一生产卵时受精使用。多余的精子则随精液排出体外。
