黄鼠狼的食性很杂,在野外以老鼠和野兔为主食,也吃鸟卵及幼雏、鱼、蛙和昆虫;在农民的家附近,常在夜间偷袭家禽,首先吸食其血液,再吃内脏及躯体,最爱吸血。也大量捕食鼠类,是害鼠的天敌。
黄鼠狼一般栖息于山地和平原,见于林缘、河谷、灌丛和草丘中、也常出没在村庄附近。居于石洞、树洞或倒木下。常见于原生和次生的落叶林、针叶林和混交林,以及开阔地带的小片森林和森林草原。
黄鼠狼属于夜行性的,尤其是清晨和黄昏活动频繁,有时也在白天活动。相机捕获和直接观察表明该物种主要是昼夜活动,尽管它已被相机捕获并发现夜间更加活跃。通常单独行动。